胚胎干細胞培養基的作用和成分
維持胚胎干細胞的自我更新能力
提供核心營養與能量
胚胎干細胞培養基通常包含基礎培養基和補充成分(如血清替代物、氨基酸、維生素、葡萄糖等),為細胞提供碳源、氮源及必需營養,支持其高速增殖和代謝需求。
示例:葡萄糖是細胞能量代謝的主要底物,而谷氨酰胺參與蛋白質合成和能量代謝,二者缺一不可。
抑制自發分化
胚胎干細胞在體外易自發分化為內胚層、中胚層或外胚層細胞,培養基通過添加特定抑制劑阻斷分化信號通路,維持細胞多能性。
關鍵成分:
LIF(白血病抑制因子):通過激活JAK/STAT3通路,抑制胚胎干細胞向滋養層細胞分化。
BMP抑制劑:阻斷骨形態發生蛋白(BMP)信號,防止胚胎干細胞向中胚層分化。
Wnt信號激活劑:維持Wnt/β-catenin通路活性,促進自我更新。
支持胚胎干細胞的高效擴增
促進細胞增殖
培養基中的生長因子和細胞因子通過激活MAPK、PI3K/Akt等信號通路,刺激胚胎干細胞進入細胞周期,加速增殖。
示例:bFGF(堿性成纖維細胞生長因子)是維持人類ESCs未分化狀態的核心因子,可促進細胞貼壁生長并抑制凋亡。
維持細胞形態與貼壁性
培養基中的基質膠或重組細胞外基質蛋白模擬體內微環境,提供細胞貼壁所需的物理支撐和生物化學信號,防止細胞懸浮死亡或聚集形成胚狀體。
優化條件:基質膠濃度需根據細胞類型調整。